FTY720诱导多发性骨髓瘤细胞株U266凋亡的机制研究

摘要：

目的:探讨FTY720对多发性骨髓瘤U266细胞凋亡的影响及相关作用机制.方法:FTY720 2.5、5、10及20 μmol/L处理U266细胞24h后,流式细胞术Annexin-V-FITC/PI染色检测细胞凋亡.应用FTY720 20μmol/L分别处理U266细胞0、6、16及24h,检测细胞凋亡率.二甲基亚砜(DMSO)及FTY720 20 μmol/L分别处理U266细胞24h,DAPI染色5min,将细胞滴于载玻片上,在荧光显微镜下观察细胞核形态.FTY720 5 μmol/L单用或/和泛Caspase抑制剂Z-VAD-fmk 12.5、25、50 μmol/L合用处理U266细胞,CCK-8方法检测细胞生存率.FTY720 0、2.5、5、10及20 μmol/L处理U266细胞24h后,使用Western bolt方法检测Cleaved Caspase-3的表达.FTY720 0、5、10及20 μmol/L处理U266细胞24 h后,应用Western blot检测MCL-1、survivin、BCL-2、BJD、BAX、BAK和P-ERK的表达.结果:FTY720明显增加U266细胞凋亡,呈浓度及时间依赖性(r=0.98,r=0.97,P＜0.05),在荧光显微镜下可观察到,FTY720处理的细胞的细胞核出现核固缩及碎裂,发生凋亡的改变,而在DMSO组未观察到此现象.Z-VAD-fmk可逆转FTY720引起的细胞凋亡,呈浓度依赖性(r =0.97,P＜0.05).FTY720可引起U266细胞MCL-1、Survivin、BCL-2表达下降,同时引起BID裂解,而对BAX,BAK,P-ERK的表达没有影响.结论:FTY720可引起U266细胞凋亡,该凋亡为Caspase-3依赖性死亡.FTY720诱导产生的凋亡是通过下调抗凋亡蛋白MCL-1、survivin、BCL-2及激活促凋亡蛋白BID实现的.

关键词：FTY720、多发性骨髓瘤、细胞凋亡、U266细胞

所属期刊栏目：23

分类号：R733.3(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81272629;中国医师协会临床医学科研专项资金-血液肿瘤临床研究资金20111210

在线出版日期：2016-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1623-1627