shRNA干扰NOTCH1基因对套细胞淋巴瘤Akt/mTOR信号通路的影响

摘要：

本研究旨在探讨RNA干扰沉默NOTCH1基因对套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞株的增殖、凋亡及Akt/mTOR信号通路的影响.针对NOTCH1基因设计短发夹RNA并将其连入pGPU6/GFP/Neo质粒中,构建NOTCHl shR-NA真核表达载体,经脂质体转染入Jeko-1细胞;应用RT-PCR及Westem blot鉴定其干扰效果,MTT法绘制细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞凋亡的变化,Western blot检测凋亡相关蛋白BCL-2、BAX、procaspase-3、procaspase-9及Akt/mTOR信号通路相关蛋白Akt、p-Akt、p-mTOR、p-P70S6K的表达.结果表明:NOTCH1 shRNA转染Jeko-1细胞后,NOTCH1基因的mRNA和蛋白表达均明显下调,有统计学差异(P＜0.05);转染组增殖率明显低于Neg-shRNA组和空白组(P＜0.05),NOTCH1 shRNA转染48 h后,凋亡率为(34.58±3.46)％,而Neg-shRNA组和空白组分别为(2.44±1.35)％、(1.72±0.64)％,有统计学差异(P＜0.05);凋亡相关蛋白BCL-2、procaspase-3、pro-caspase-9的表达下调,而BAX表达上调;干扰NOTCH1基因后Akt总蛋白未见明显变化,而p-Akt、p-mTOR、p-P70S6K的表达下降.结论:干扰沉默NOTCH1基因可抑制套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞增殖,诱导细胞凋亡,通过去磷酸化抑制Akt/mTOR信号通路可能是其机制之一.

关键词：套细胞淋巴瘤、NOTCH1基因、RNA干扰、Akt/mTOR信号途径

所属期刊栏目：22

分类号：R733.1(肿瘤学)

资助基金：福建省引进重大研发机构资助项目2012I2004

在线出版日期：2015-03-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1616-1620