华通胶间充质干细胞低温保存后生物学特性研究

摘要：

本研究旨在探讨低温保存对华通胶间充质干细胞(WJ-MSC)生物学特性的影响,为低温保存后WJ-MSC的临床应用及建立WJ-MSC库提供实验依据.通过脐带组织决培养制备WJ-MSC,将第5代WJ-MSC加入低温保护剂,-80℃冰箱降温,液氮保存.细胞复温后行培养和传代,低温保存组第1代(PPl)传代获得PP2-PP15.非低温保存组第6代为对照组第1代(CPl),传代获得CP2-CP15.比较对照组与低温保存组WJ-MSC的有核细胞回收率、台盼蓝拒染率、CCK-8活性、凋亡率、贴壁率、增殖指数、细胞表面抗原、细胞周期和向脂肪细胞、成骨细胞及神经元细胞诱导分化能力.结果表明,WJ-MSC经低温保存,有核细胞回收率为98.2％,台盼蓝拒染率为94.3％,CCK-8活性为91.4％,凋亡率为3.9％,贴壁率为92.6％；PP1较CP1增殖指数明显降低(P＜0.05),PP2-PP15与相应对照组增殖指数的差异均无统计学显著性；WJ-MSC高表达CD29、CD90、CD44、CD71、CD73、CD105、CD166和HLA-ABC,低表达CD34、CD45和HLA-DR,两组之间差异均无统计学显著性；增殖潜伏期和对数增殖期两组之间差异也无统计学意义；向脂肪细胞、成骨细胞和神经元细胞诱导分化后分别进行油红O、碱性磷酸酶(ALP)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)染色,两组间阳性强度肉眼观察无明显差异；细胞内甘油三酯、ALP和NSE含量两组间也无显著差异.结论:WJ-MSC低温保存后少量细胞(＜10％)受到损伤,传代培养表明其生物学特性基本保持不变.

关键词：华通胶、间充质干细胞、低温保存、生物学特性

所属期刊栏目：21

分类号：R329.28(人体形态学)

在线出版日期：2013-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：181-187