磷酸特异化流式细胞术检测骨髓白血病细胞磷酸化信号蛋白的实验研究

摘要：

本研究通过建立磷酸特异化流式细胞术(phospho-specific flow cytometry,phospho-flow)检测白血病细胞信号通路磷酸化蛋白的实验方法,探讨Phospho-flow在白血病研究中的应用价值.取白血病患儿的骨髓,分别采用Phospho-flow单个核细胞法和Phospho-flow直接固定法进行处理.Phospho-flow单个核细胞法为:骨髓经提取单个核细胞并固定破膜处理后,加入磷酸化抗体( P-AKT,P-ERK1/2)孵育,然后用流式细胞仪分析；Phospho-flow骨髓直接固定法为:骨髓经固定/裂解液和90％甲醇破膜细胞处理,然后加入细胞表面CD抗体及P-AKT,P-ERK1/2孵育,然后上流式细胞仪分析处理.结果表明,26例白血病患儿骨髓经phospho-flow单个核细胞法处理,P-AKT和P-ERK1/2阳性率分别为46.2％和30.8％,经phospho-flow骨髓直接固定法处理,P-AKT和P-ERK1/2阳性率分别为50.0％和38.5％.经统计学分析,两种phospho-flow的骨髓处理方法在检测P-AKT和P-ERK1/2的阳性率方面无统计学差异(p＞0.05).结论:本实验室建立的phospho-flow骨髓直接固定法,能有效检测白血病患儿骨髓细胞的磷酸化蛋白,可用于白血病信号通路的实验研究.

关键词：磷酸化流式细胞术、磷酸化信号蛋白、白血病

所属期刊栏目：19

分类号：R446.1;R733.7(诊断学)

在线出版日期：2013-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1176-1179