高纯度CD3-CD56+CD16+NK细胞体外扩增技术的研究
本研究探索高纯度CD3-CD56+CD16+NK细胞体外扩增技术.应用免疫磁珠分选法(MACS)分离出高纯度的CD3-CD56+CD16+NK细胞,置于含10%人AB血清的造血干细胞培养基(SCGM)中,加入细胞因子IL-2、IL-15、SCF组成不同培养体系进行体外扩增.采用细胞计数法、流式细胞术免疫表型分析和CCK-8试剂盒检测时K562细胞的杀伤率等方法比较不同培养体系对NK细胞增殖前后的数量、纯度及杀伤活性的影响;并采取相同方法时IL-2的浓度与NK细胞增殖效率及杀伤活性之间的关系进行探讨.结果发现,经免疫磁珠分选法所得的高纯度CD3-CD56+CD16+NK细胞扩增18天后,IL-2/IL-15/SCF组扩增倍数显著高于其他组(P<0.05);含细胞因子组的NK细胞对K562细胞的杀伤活性显著提高,尤其是IL-2/IL-15组和IL-2/IL-15/SCF组在效靶比10:1时杀伤活性均高达90%以上.低、中、高浓度IL-2组扩增倍数之间比较差异无显著性(p>0.05),而在对K562细胞杀伤率的比较上,高浓度组明显高于低、中浓度组(p<0.05).结论:在10%人AB血清的SCGM中加入IL-2/SCF/IL-15细胞因子组合,可使经MACS纯化的NK细胞在体外高效地活化及增殖;本培养体系中IL-2浓度较低(<1 000U/ml)时,NK细胞的扩增效率及对K562细胞的杀伤率与IL-2的浓度高低无相关性;而高浓度的IL-2(≥1 000 U/ml)可进一步激活纯化后NK细胞的体外杀伤活性.
CD3-CD56+CD16+NK细胞、MACS、细胞因子
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R392.1;R392.3
广东省自然科学基金资助项目,编号7009938
2013-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
1310-1315
