mica基因的克隆及其在原核系统中的表达

摘要：

本研究构建mica基因原核表达系统并纯化MICA蛋白.利用外周血标本提取RNA,经RT-PCR获取mica基因cDNA.将mica cDNA经TOPO克隆连接构建克隆载体,然后将克隆重组载体和原核表达栽体pET-28a经双酶切后进行连接构建重组表达载体,进而转染宿主菌E. coli BL21 DE3进行表达.利用亲和层析的Ni-NTA Spin纯化重组的MICA蛋白.结果表明:带有重组质粒pET-28a-mica的宿主菌经IPTG诱导表达后,以可溶性形式大量表达重组的MICA蛋白,经Ni-NTA Spin纯化后得到重组的MICA蛋白.结论:本研究构建了mica基因原核表达系统并纯化了MICA蛋白,为探讨MICA与移植免疫的关系奠定了基础.

关键词：MICA基因、基因克隆、原核表达

所属期刊栏目：18

分类号：R392.4

资助基金：浙江省卫生厅科学研究基金,编号 2007A045和2010KYA055

在线出版日期：2013-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1256-1259