CD44基因沉默对K562/A02细胞逆转耐药及生物学活性的研究
本研究旨在探讨CD44基因表达抑制对白血痛多药耐药细胞株K562/A02耐药性及生物学活性的影响.根据CD44基因表达序列设计有效的RNA干扰片段,将其插入质粒表达载体中,获得针对CD44 mRNA的特异性siRNA真核质粒(pGCsiRNA-CD44),转染K562/A02细胞.用实时荧光定量RT-PCR检测K562/A02细胞CD44、mdr-1和bcl-2 mRNA的表达;用MTT法检测阿霉素对K562/A02细胞的半数抑制浓度(IC50);流式细胞术(FACS)检测细胞周期;Hochest 33258染色荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学变化.结果表明:针对CD44基因的siRNA真核质粒可有效沉默K562/A02细胞的CD44基因:与对照组相比,转染了4条pGCsiRNA-CD44质粒的K562/A02细胞CD44表达均明显受抑,以转染了siCD44-1的细胞中抑制最强.转染pGCsiRNA-CD44质粒48小时后,K562/A02细胞CD44 mRNA表达水平下降64.1%(p<0.05),同时mdr-1与bcl-2 mRNA的表达量较对照组分别下降了25.6%与50.8%;K562/A02细胞IC50为(17.97±1.61)μg/ml,无义序列质粒转染后阿霉素对K562/A02细胞的IC50为(16.95±1.72)μg/ml,pGCsiRNA-CD44转染后IC50明显降低为(8.77±1.63)μg/ml(p<0.01).转染48小时后,G0/G1期细胞比例提高了10.7%;细胞出现核固缩、核边集、凋亡小体等改变.结论:特异性CD44 siRNA可显著抑制K562/A02细胞CD44基因的表达,抑制细胞增殖,诱导其凋亡.并有效逆转K562/A02细胞的多药耐药性.
CD44基因、基因沉默、K562/A02细胞、多药耐药
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R733.7;R730.5(肿瘤学)
2013-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
335-339
