同源重组细胞基因敲除与siRNA基因沉默的效果比较

摘要：

本研究比较细胞系同源重组基因敲除(gene knockout)与siRNA基因沉默(gene silence)二种技术方法用于研究蛋白功能方面的效果差异.对鸡B淋巴细胞瘤来源的DT40细胞系,应用基因打靶技术分离出Sam68基因缺失的细胞株,并且利用稳定表达siRNA的质粒pSilencer-Sam68得到Sam68基因沉默的细胞株.与野生型细胞株相比,对这些细胞株进行Sam68的功能解析.结果表明:Sam68基因缺失细胞表现出明显的生长速度迟缓,通过细胞周期检测揭示这些细胞生长速度延迟是由于细胞周期中的G2/M期延长;但在Sam68基因沉默细胞中却没有看到这些变化.结论:针对活细胞中的蛋白功能研究,应用细胞系基因敲除技术比siRNA基因沉默技术能够得到更加清晰的实验结果.

关键词：基因敲除、基因沉默、Sam68、DT40

所属期刊栏目：18

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：天津市自然科学基金资助项目编号08JCZDJC19100,09JCZDJC17300

在线出版日期：2013-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：122-126