异硫氰酸苯己酯降低U266细胞株p16基因甲基化的研究

摘要：

本研究探讨异硫氰酸苯己酯对p16基因高甲基化的多发性骨髓瘤U266细胞株是否有去甲基化的作用.用异硫氰酸苯己酯0、5、10 μmol/L孵育U266细胞株,提取DNA备用.用亚硫酸氢盐处理正常人基因组DNA,并以此为模板进行PCR扩增.设计1组特殊荧光标记探针以构建1种检测p16基因启动子区3个CpG位点甲基化改变的芯片,特殊荧光标记探针包括1对非甲基化探针和甲基化探针,检测相邻的3个CpG位点甲基化的程度.采用基因芯片的方法,将完全未甲基化的DNA和完全甲基化的DNA混合后制成标准曲线,将U266细胞株样本处理后点在芯片上与标准曲线进行比较后得出定量检测的结果.结果表明:芯片上探针的可重复性和精确性很好,0、5、10 μmol/L异硫氰酸苯己酯处理后的U266细胞株p16基因的甲基化程度分别为78.2%、61.7%、54.8%.结论:异硫氰酸苯己酯可以降低U266细胞株p16基因甲基化的程度.

关键词：异硫氰酸苯己酯、U266细胞株、p16基因甲基化、基因芯片

所属期刊栏目：16

分类号：R733.3(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目编号39970832;国家自然科学基金项目编号30600152

在线出版日期：2013-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1060-1063