融合蛋白hJagged1ext-Fc毕赤酵母表达载体的构建及表达
本研究旨在构建人IgG1 Fc蛋白及融合蛋白hJagged1ext-Fc,并在毕赤酵母GS115中表达.用RT-PCR法从人骨髓细胞中扩增hJagged1基因的胞外段.在测序正确后,将hJagged1基因的胞外段插入构建好的PIC-Fc载体,得到PIC-hJagged1ext-Fc.用MD平板筛选重组子,G418法筛选高拷贝转化子,经甲醇诱导表达后,采用SDSPAGE分析表达蛋白.结果表明:hJagged1基因的胞外段被有效地扩增.序列分析显示所构建的舍phJagged1ext-Fc融合基因的质粒与设计相同,人IgG1 Fc蛋白及融合蛋白hJagged1ext-Fc得到正确表达.结论:成功地构建了hJagged1ext-Fc融合基因的毕赤酵母表达载体,并在毕赤酵母中正确表达,为进一步研究Jagged1在造血干/祖细胞的体外扩增奠定了基础.
Jaggedl、hJagged1ext-Fc、造血干/祖细胞、Notch、融合蛋白、毕赤酵母
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Q789;Q782;R331.2(基因工程(遗传工程))
"十一五"国家"863"重大、重点项目基金资助,编号2006AA02A111
2013-05-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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