吴茱萸碱对不同种系小鼠免疫功能的调节
本研究探讨吴茱萸碱对不同种系小鼠胸腺细胞和脾细胞的增殖、凋亡及生物功能的影响.处死8周龄雄性BALB/c、C57BL/6及F1代杂交鼠.取其胸腺、脾制备单细胞悬液.用MTT法测定ConA诱导后脾和胸腺细胞增殖活性,用ELISA法测定培养上清IL-2活性,RT-PCR检测0.75 μmol/L吴茱萸碱处理的细胞bcl-2和cdk2基因mRNA水平,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率,以双氢二绿荧光黄(2 7-dichlorofluoreseein,DCF)阳性的细胞百分比间接检测细胞内活性氧(ROS)水平,应用荧光显微镜检测BCL-2、CDK2、BAX蛋白表达率.结果表明:当吴茱萸碱浓度≥0.5 μmol/L时,在24、48和72小时3种小鼠ConA诱导的胸腺细胞、脾细胞的增殖均被抑制(P<0.05),吴茱萸碱处理的各种系小鼠脾细胞和胸腺细胞释放IL-2的功能较对照组明显减低(P<0.05),吴茱萸碱0.75μmol/L处理后细胞bcl-2和cdk2的mRNA水平较时照组明显降低.与对照组相比,吴茱萸碱0.75 μmol/L处理6、12、24小时均可诱导3种小鼠胸腺细胞、脾细胞明显凋亡(P<0.05).12小时药物组DCF阳性细胞均明显高于对照,24和48小时药物组DCF阳性的细胞百分比与对照组无明显差异,但药物处理组细胞出现大小不一的两群细胞,直方图呈双峰,其中一群细胞DCF呈阴性,这表明昊茱萸碱使细胞内ROS水平增高,但随着药物处理时间的延长,濒死细胞内ROS水平明显降低.吴茱萸碱处理后BCL-2、CDK2蛋白表达明显降低,BAX蛋白表达上调.结论:吴茱萸碱可通过bel-2、cdk2下调,抑制多种系小鼠体外培养的脾细胞和胸腺细胞增殖并诱导其凋亡,同时细胞分泌IL-2的活性亦明显下降.
吴茱萸碱、免疫功能、细胞凋亡、白介素-2
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R979.1;R392(药品)
2013-05-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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