Kir2ds4基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定

摘要：

本研究旨在构建kir2ds4基因RNAi慢病毒载体.针对已经筛选确定的kir2ds4基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经Hpa Ⅰ和Xho Ⅰ酶切后的pSicoR-GFP载体[含U6启动子和绿色荧光蛋白(GFP)]连接产生LV-shkir2ds4慢病毒载体,应用PCR筛选阳性克隆并进行测序鉴定.用LV-shkir2ds4,包装系统质粒共转染包装细胞293T细胞,产生慢病毒颗粒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度.结果表明,PCR和测序结果证实成功地构建了kir2ds4shRNA的慢病毒栽体LV-shkir2ds4.293T细胞测定病毒滴度为6×10 8TU/ml.结论:成功地构建了人kir2ds4基因RNAi慢病毒载体.

关键词：RNA干扰、kir2ds4基因、慢病毒载体

所属期刊栏目：16

分类号：Q78;Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：全军医学科研重大项目,编号01MB068

在线出版日期：2008-07-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：663-666