通过FasL通路阻抑肿瘤免疫逃逸的研究

摘要：

许多白血病和实体瘤细胞通过高表达Fas配体(FasL)而发生肿瘤的免疫逃逸.为了观察腺病毒载体向肿瘤细胞导入小鼠可溶性Fas(sFas)基因后能否阻抑肿瘤细胞通过FasL发生肿瘤免疫逃逸作用,采用AdEasy腺病毒载体系统,利用大肠杆菌内质粒间同源重组的方法分别构建携带小鼠sFas基因及增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的重组腺病毒载体,扩增纯化后利用空斑试验测定滴度,Western blot检测蛋白的表达.然后,分别感染肿瘤细胞-EL4细胞,用氚胸腺嘧啶核苷(3H-thymidine,3H-TdR)掺入法检测其诱导靶细胞YAC-1的凋亡率.结果表明,获得了重组成功的复制缺陷的腺病毒载体AdsFas和AdEGFP,密度梯度离心纯化后其滴度达到1011pfu/ml,Westem blot分析证实前者能够高效表达出sFas蛋白.转染肿瘤细胞EL4细胞之后与YAC-1细胞混合培养,导入sFas组的YAC-1凋亡率在效靶比(E:T)为3:1,10:1和30:1时分别为6%、7%和9%,与对照组(分别为28%、37%和45%)相比明显下降,统计学有显著性差异(P＜0.01);而导入EGFP组YAC-1凋亡率(分别为30%、36%和48%)与对照组相似,没有统计学差异(P＞0.05).结论:腺病毒介导sFas的导入能够明显抑制肿瘤细胞EL4诱导Fas+细胞-YAC-1的凋亡,说明通过腺病毒转移sFas基因,在体外可以达到阻抑肿瘤细胞表面FasL产生的免疫逃逸作用,为寻找新的途径治疗肿瘤提供了方向.

关键词：Fas配体、重组腺病毒、肿瘤免疫逃逸、白血病

所属期刊栏目：11

分类号：R730.231;R733.7(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金39970708

在线出版日期：2004-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：616-621