人B细胞淋巴瘤独特型DNA疫苗诱导抗肿瘤免疫反应的实验研究

摘要：

本研究目的在于探讨含人B细胞淋巴瘤免疫球蛋白重链可变区基因片段的DNA疫苗诱导小鼠抗肿瘤免疫反应的情况,为人B细胞淋巴瘤疫苗的应用提供基础实验研究资料.本研究通过PCR方法获得人B细胞淋巴瘤细胞系Namalwa膜表面免疫球蛋白重链可变区(VH)基因片段,同时克隆小鼠单核细胞趋化蛋白-3(MCP-3)作为免疫佐剂分子,进一步以重组PCR的方法获得MCP-3和VH基因的融合基因片段,构建DNA疫苗重组质粒.在体外以瞬时转染的方法证实以融合基因片段作为抗原基因的DNA疫苗质粒能够在真核细胞中正确表达.DNA疫苗质粒大量提取后免疫小鼠,用流式细胞术检测小鼠抗体生成情况,并用LDH释放法测定CTL活性以检测抗独特型细胞免疫.结果表明,从接种疫苗第8周开始小鼠体内特异性抗独特型抗体明显升高,并且抗体滴度可维持高水平至少至第20周.在DNA疫苗免疫组中5只免疫小鼠有3只产生抗体.所诱导的抗体只特异性识别肿瘤细胞表面独特型抗原,而不识别人A549对照细胞.用乳酸脱氢酶释放法未测到明显CTL反应的产生.结论:以MCP-3与VH的融合作为抗原基因构建的DNA疫苗能够诱导小鼠体内产生抗淋巴瘤细胞的特异性抗独特型抗体,为DNA疫苗临床用于人B细胞淋巴瘤治疗提供了初步实验支持.

关键词：B细胞淋巴病、DNA疫苗、免疫球蛋白重链可变区(VH)、抗肿瘤免疫反应

所属期刊栏目：11

分类号：R392.1;Q784

在线出版日期：2004-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：609-615