10.3969/j.issn.1009-2137.2003.06.006
人组织因子基因表达载体的构建及其在人卵巢癌细胞系中的表达
本研究旨在克隆人组织因子(TF)并研究其在稳定转染的人卵巢癌细胞系中的表达.采用分子克隆技术构建人TF真核表达载体pcDNA3-TFcDNA;应用脂质体介导的基因转移技术将其导入人卵巢癌细胞系A2780内,采用G418筛选稳定表达的转染细胞,用流式细胞术和RT-PCR进行TF表达水平的检测.结果显示:①构建产物经基因测序证实为pcDNA3-TFcDNA重组体;②稳定转染的A2780细胞内TF mRNA水平显著增高,转染细胞为3.91±0.28,未转染细胞为0.97±0.23(P<0.01);③转染细胞表面TF表达显著增高,转染细胞为(48.56±9.53)%,未转染细胞为(2.73±1.15)%(P<0.01).结论:成功地构建了TF真核表达载体并建立了稳定、高效表达TF的人卵巢癌细胞系A2780/TF,为研究TF在肿瘤高凝状态、肿瘤生长与浸润转移中的作用及其机制,探索抑癌基因治疗新途径建立了实验基础.
组织因子、基因表达、真核表达载体、卵巢癌细胞
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Q782;R737.31(基因工程(遗传工程))
2004-04-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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