编码人B7-2胞外区cDNA的克隆、表达及生物活性鉴定

摘要：

B7-2分子是共刺激信号系统B7/CD28/CTLA-4中的重要成员之一,为了更深入地探讨B7-2分子在调控T细胞增殖、分化及相关信号传导过程中的作用,本研究通过聚合酶链式反应(PCR)扩增编码人B7-2分子胞外区的cDNA,测序后定向插入多个原核表达载体并诱导目的蛋白表达,用Western印迹和MTT鉴定生物活性.结果表明:通过pGEX-4T-2载体实现了在宿主菌BL-21(DE3)-codenplUs-RIL中较高水平的表达,蛋白表达量为20%.经Western印迹和MTT鉴定,所表达及初步纯化的B7-2胞外区重组蛋白能与抗人B7-2单抗发生特异性结合;在抗人CD3单抗的协同下,B7-2胞外区重组蛋白能有效地促进外周血单核细胞的增殖.结论:B7-2胞外区重组蛋白的获得为进一步研究B7-2分子结构与功能的关系奠定了基础.

关键词：人B7-2分子、共刺激信号系统、原核表达、基因克隆

所属期刊栏目：10

分类号：Q753(分子遗传学)

资助基金：国家自然科学基金39900187,30200111;军队科研项目0985

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：508-511