优化流式细胞术测定保存血小板CD62p表达

摘要：

CD62p阳性率是保存血小板质量监测的重要指标之一.为在静脉全血内血小板CD62p测定方法的基础上优化建立流式细胞术(FCM)测定保存血小板表达CD62p的方法,在血小板检测标本内加入0.1 mmol/L潘生丁稳定血小板;对TBS溶液进行了改良,添加了1.1mmol/L的EDTA和100μmol/L潘生丁,用以代替PBS;采用新鲜富含血小板血浆(FPRP)制备的阴、阳性对照;进行方法学评价.结果表明:加入0.1 mmol/L潘生丁和1.1mmol/L的EDTA可以有效防止实验过程中的血小板人为激活;采用新鲜富含血小板血浆(FPRP)制备的阴、阳性对照既可优化FCM分析方法,还可用于检验所购荧光抗体的质量,保证实验结果的有效性.采用泛血小板特异性标志物CD61可灵敏特异地识别血小板,提高了实验抗干扰能力.制备保存血小板时采用的是专用大号采血针,抽血流畅,对血小板CD62p表达测定人为影响很小,明显优于用注射器采集患者静脉全血的做法.CD62p测定灵敏度可达1%,制备的标本可稳定48小时.结论:利用该流式细胞术可以灵敏而特异地测定保存血小板的CD62P表达率;该方法简便易行,提高了结果的准确性,具有良好的稳定性和重复性.

关键词：流式细胞术、血小板保存、CD62p

所属期刊栏目：10

分类号：R-331.143;R457.1(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金39970812

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：462-465