H9N2亚型AIV NP蛋白的原核表达及其免疫效果

摘要：

旨在探讨H9亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)NP蛋白对小鼠的免疫效果,为研制AIV疫苗奠定基础.试验将H9N2亚型病毒NP基因的扩增产物连接到pET-32a表达载体中,构建重组质粒pET-32a-NP,并将其转入大肠杆菌BL21(DE3)细胞,IPTG诱导后,通过SDS-PAGE和 Western blot验证蛋白表达,用NP重组蛋白免疫小鼠,测定小鼠血清中IgG抗体和脾细胞培养上清多细胞因子分泌情况评价其免疫效果.结果显示:NP基因编码区序列全长1 497 bp,NP重组蛋白以可溶性和不可溶性蛋白两种形式存在,Western blot结果可见特异性条带.免疫小鼠后血清产生IgG结合抗体,抗体效价为1∶40 000,与对照组相比,IL-2、IL-5、IL-13分泌量极显著提高(P＜0.001),IL-6分泌量显著提高.IL-4和IL-12 p70分泌量与对照组相比升高,却没有显著性差异.而免疫组与对照组相比IL-1β、IL-18、GM-CMF、TNF-α、IFN-γ分泌量被抑制,但差异不显著(P＞0.05).结果表明,NP重组蛋白是一种良好的免疫原,为流感疫苗的深入研究奠定了基础.

关键词：H9N2亚型禽流感、NP蛋白、原核表达、细胞因子

所属期刊栏目：44

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：广西重点研发计划资助项目;桂科专项资助项目;广西自然科学基金资助项目;广西自然科学基金资助项目;广西八桂学者资助项目

在线出版日期：2024-09-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1113-1119