ACAC通过mTOR信号通路抑制自噬诱导奶牛乳腺上皮细胞氧化应激

摘要：

旨在探究乙酰乙酸(acetoacetic acid,ACAC)是否通过抑制mTOR信号通路介导的 自噬诱导奶牛乳腺上皮细胞发生氧化应激.用不同浓度的ACAC(0,0.6,1.2或1.8 mmol/L)处理奶牛乳腺上皮细胞系(MAC-T)24 h;用2.5 μmol/L的雷帕霉素(rapamycin,RAPA)预处理MAC-T 24 h后加入1.2 mmol/L ACAC处理24 h.使用试剂盒检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性,采用蛋白质免疫印迹法测定mTOR、p-mTOR、LC3-Ⅱ及p62的蛋白表达情况,通过q-PCR对自噬相关因子5(autophagy related 5 homolog,ATG5)和自噬相关因子7(autophagy related 7 homolog,ATG7)的基因表达水平进行定量分析.结果显示,与0 mmol/L ACAC组相比,不同浓度ACAC处理后,ROS的含量呈浓度依赖性升高,SOD的活性逐渐下降,p-mTOR/mTOR蛋白表达量显著升高,而ATG5、ATG7的基因表达水平显著降低.与ACAC+DMSO组相比,ACAC+RAPA组的p-mTOR/mTOR及p62蛋白表达量显著降低,而LC3-Ⅱ蛋白表达量显著升高,ATG5、ATG7的基因表达水平显著升高.此外,与ACAC+DMSO组相比,ACAC+RAPA组的ROS含量显著降低,SOD活性显著升高.结果表明,ACAC通过抑制mTOR信号通路介导的 自噬诱导了奶牛乳腺上皮细胞氧化应激.因此,mTOR介导的 自噬可能是缓解代谢应激导致奶牛乳腺上皮细胞氧化应激的防治靶点.

关键词：mTOR、自噬、ACAC、奶牛乳腺上皮细胞、氧化应激

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分类号：S852.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;黑龙江省应用技术研究与开发计划资助项目;黑龙江省现代农业产业技术协同创新推广体系建设资助项目;黑龙江八一农垦大学研究生创新科研资助项目

在线出版日期：2023-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1456-1462