沙门菌H:t抗原表位单克隆抗体的制备及初步应用

摘要：

山夫顿堡沙门菌、加利福尼亚沙门菌、奥拉宁堡沙门菌等含有H:t表位的血清型沙门菌具有较广泛的流行性和致病性,研制特异性识别H:t表位的单克隆抗体可为这些血清型沙门菌的快速、高效检测提供重要生物材料.本研究选用奥拉宁堡沙门菌鞭毛蛋白作为免疫原,通过经典B细胞杂交瘤技术筛选制备特异性识别沙门菌H:t抗原表位单克隆抗体,利用间接ELISA、Western blot方法对其亚型、效价、亲和力、特异性等生物学特性进行分析.结果显示,筛选获得2株单抗并命名为4H4和5G10,其亚型均为IgG1,其中4H4单抗的细胞培养上清效价达2.0×105,腹水效价达1.0×107,亲和力为2.04×1010 mol/L.Western blot分析显示4H4单抗与含H:t抗原表位的奥拉宁堡沙门菌、山夫顿堡沙门菌、加利福尼亚沙门菌特异性反应,而与不含H:t抗原表位的沙门菌和非沙门菌不反应.将该单抗用于鸡肉模拟污染样品中沙门菌的ELISA检测,能够检测出含H:t表位的血清型沙门菌,而不含H:t表位的沙门菌和非沙门菌均为阴性.本研究制备了沙门菌H:t抗原表位特异性单抗,可应用于ELISA检测含H:t表位的沙门菌造成的食品污染,为建立特定血清型沙门菌相关免疫学检测方法提供了重要材料基础.

关键词：沙门菌、鞭毛蛋白、H:t抗原表位、单克隆抗体、ELISA检测

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分类号：S852.61;R535(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;江苏省重点研发计划现代农业资助项目;江苏省政策引导类计划国际科技合作港澳台科技合作资助项目;扬州大学科技创新团队资助项目

在线出版日期：2023-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1442-1449