山羊γ-干扰素的生物信息学分析及其在羊肾细胞中的瞬时表达

摘要：

利用RT-PCR方法从山羊外周血淋巴细胞中获得山羊γ-干扰素全长基因,进行基因序列分析后,将其克隆pCDNA3.1,构建重组表达质粒pCDNA3.1-CapIFN-γ,经脂质体转染至羊肾细胞中,并进行目的蛋白的SDS-PAGE和Western blot鉴定,分析CapIFN-γ重组蛋白的表达情况.利用细胞病变抑制法测定CapIFN-γ重组蛋白对羊痘病毒的抗病毒活性.结果显示,扩增的CapIFN-γ基因序列全长为501 bp,共编码166个氨基酸,其中前23位氨基酸为信号肽序列,CapIFN-γ的α-螺旋和无规则卷曲含量较高,羊肾细胞表达的目的蛋白约为25 kD,通过对CapIFN-γ的抗病毒活性检测,发现其对羊痘病毒的增殖具有一定抑制作用,其抗病毒活性为2.2×103U/mL.本研究利用羊肾细胞成功表达了CapIFN-γ重组蛋白,并对其活性进行了初步分析,为真核表达系统获取的CapIFN-γ抗病毒作用机制的深入研究和抗山羊病毒病产品研发奠定了基础.

关键词：山羊、γ-干扰素、生物信息学、瞬时表达、抗病毒活性

所属期刊栏目：43

分类号：S852.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：重庆市科研机构绩效激励引导专项资助项目;重庆市自然科学基金面上资助项目;重庆市自然科学基金面上资助项目;重庆荣昌农牧高新技术产业研发专项资助项目

在线出版日期：2023-09-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1250-1256