鸭甲肝病毒1型和3型一步法双重RT-PCR鉴别检测方法的建立及其初步应用

摘要：

为建立一种快速鉴别不同基因型鸭甲肝病毒(DHAV)的检测方法,根据DHAV-1和DHAV-3特异性序列,分别设计合成鉴别检测引物,经一步法双重RT-PCR反应条件的优化,建立了鉴别DHAV-1和DHAV-3的一步法双重RT-PCR方法,并应用该方法对2016-2021年山东地区采集的58份临床病料样品进行病原学检测分析.结果显示:该方法能够分别扩增出DHAV-1的230 bp和DHAV-3的502 bp的特异性条带,而DTMUV、NDV、AIV-H9、FADV、DEV、GPV均无任何扩增条带.该方法最低可检测到0.62 ng DHAV-1 RNA和0.59 ng DHAV-3 RNA.该方法与病毒分离方法的符合率达100％.该方法检测58份临床病料样品,共检测出阳性样品27份,阳性率达46.55％,其中 2016-2021 年 DHAV-1 阳性率分别为 33.33％,25.00％,22.22％,12.50％,11.11％,0.00％;DHAV-3阳性率分别为 8.33％,16.67％,22.22％,37.50％,33.33％,37.50％.表明建立的 DHAV-1 和 DHAV-3 一步法双重RT-PCR鉴别检测方法具有良好的特异性、敏感性、准确性和临床适用性;同时发现山东地区DAHV的优势流行毒株已由DHAV-1转变为DHAV-3.

关键词：鸭甲肝病毒、一步RT-PCR、鉴别检测方法、病原学、流行毒株

所属期刊栏目：43

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：山东省外专双百计划资助项目;海南省农业科学院院级项目

在线出版日期：2023-04-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：55-60