猪CCL2的原核表达及其多克隆抗体的制备

摘要：

CCL2作为一种典型的促炎因子,在病毒感染、各类肿瘤、自身免疫疾病等许多病症的发生、发展中都有着举足轻重的意义,然而猪的CCL2研究鲜有报道.本研究使用PCR方式扩增CCL2基因,将其克隆于大肠杆菌原核表达系统的pET-28a(+)表达载体中,成功构建重组表达质粒pET-28a(+)-CCL2,转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,再经0.1mmol/L的IPTG诱导表达,SDS-PAGE结果表明猪CCL2蛋白在大肠杆菌中获得可溶性表达.将CCL2蛋白纯化后免疫新西兰大白兔,4次免疫后收集血清,通过ELISA方法检测其效价达到1 ∶128 000.Western blot和IFA测定结果显示本研究获得的猪CCL2多克隆抗体具有较好的特异性.本研究获得的猪CCL2蛋白和针对CCL2的兔多克隆抗体为未来研究猪CCL2的在疾病中的相关作用及生物学功能提供了试验材料.

关键词：猪CCL2、原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：43

分类号：S852(动物医学（兽医学）)

资助基金：中国博士后科学基金资助项目;国家自然科学基金;河南省高等学校重点科研资助项目

在线出版日期：2023-04-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：29-34