鉴别猪流行性腹泻病毒ORF3基因截短株常规PCR及双重荧光PCR方法的建立及初步应用

摘要：

猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的一种以水样腹泻、呕吐和脱水为主要特征的猪急性肠道传染病.PEDV细胞适应性毒株与其他毒株之间的区别主要发生在ORF3基因,该基因的缺失可作为病毒适应细胞的标志.本实验室前期分离获得了1株广西自然截短的PEDV毒株17GXCZ-1ORF3d,为更好地鉴别不同类型毒株,本研究建立了可鉴别PEDV ORF3基因自然截短株的常规PCR以及双重荧光PCR检测方法.结果显示,2种方法均能鉴别PEDV ORF3基因截短株,且特异性好.另外,双重荧光PCR的检测下限为100.59PFU/mL,比所建立的常规PCR方法灵敏100倍,敏感性高.对收集的221份临床样品进行初步应用,常规PCR检出126份阳性样品,其中鉴别出14份ORF3基因截短株单独感染样品,而双重荧光PCR检出阳性样品145份,同样鉴别出14份ORF3基因截短株单独感染样品.本研究建立的2种PCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,对PEDV ORF3基因截短株的快速鉴别与检测具有重要意义.

关键词：猪流行性腹泻病毒、双重荧光PCR、ORF3基因、自然截短毒株、鉴别诊断

所属期刊栏目：42

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：广西自然科学基金资助项目2021GXNSFAA196067

在线出版日期：2022-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1737-1743