10.16303/j.cnki.1005-4545.2022.07.09
鸭星状病毒3型TaqMan探针荧光定量PCR检测方法的建立与应用
根据已报道的鸭星状病毒3型(duck astrovirus-3,DAstV-3)毒株的nsp1a基因序列设计并合成特异性引物和探针,经优化反应条件建立一种以nsp1a基因为靶标的检测DAstV-3的TaqMan实时荧光定量PCR方法.结果显示,该方法的Ct与标准品模板浓度在2.13×101~2.13×107拷贝/μL之间线性关系良好,相关系数R2和扩增效率分别为0.997和1.09;该方法仅特异性检出DAstV-3核酸,而对其他鸭常见病毒核酸无扩增反应;最低检测下限为21.30拷贝/μL;组内和组间重复试验变异系数分别为0.58%~2.19%和0.68%~2.53%,均低于5.00%;利用所建方法对临床采集的231份疑似DAstV-3感染病料进行检测,发现DAstV-3的阳性率为57.10%(132/231).结果表明,本试验所建方法操作简便、特异、敏感、重复性好,为DAstV-3的临床检测和流行病学调查提供技术支持.
鸭星状病毒3型、nsp1a基因、TaqMan、实时荧光定量PCR
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S852.65(动物医学(兽医学))
福建省科研院所公益性行业专项基金资助项目;福建省科研院所公益性行业专项基金资助项目;福建省农业科学院国家自然科学基金培育项目;现代农业产业技术体系;江西省双千计划人才基金资助项目;福建省农业科学院禽病防控重点创新团队基金资助项目
2022-09-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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