10.16303/j.cnki.1005-4545.2022.07.01
猪圆环病毒-Ⅱ型、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒三重RT-qPCR检测方法的建立及初步应用
针对猪圆环病毒-Ⅱ型(porcine circovirus type Ⅱ,PCV-Ⅱ)、猪瘟病毒(swine fever virus,CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的保守区域设计用 于构建荧光定量PCR体系的引物和探针.以构建的重组质粒标准品为模板建立三重荧光定量PCR体系,并对三重荧光定量PCR体系进行优化和特异性检测、灵敏性检测、重复性试验、标准曲线制作.最后利用构建的三重荧光定量PCR体系和普通PCR体系同时进行临床检测,并对两者的检测结果进行对比.结果显示,3种病毒在单重和三重荧光定量PCR体系中均无非特异性扩增;3种病毒在单重和三重荧光定量PCR体系中的灵敏度均可达到10拷贝/μL;单重和三重荧光定量PCR体系组内和组间重复性变异系数均在5%以内;单重和三重荧光定量PCR在稀释度范围内呈现良好的线性关系.应用本研究构建的三重荧光定量PCR体系对106份临床组织样品进行检测,其中PCV-Ⅱ阳性检出率为74.5%,CSFV阳性检出率为34.9%,PRRSV阳性检出率为18.9%,普通PCR检测中PCV-Ⅱ阳性检出率为37.7%,CSFV阳性检出率为16.9%,PRRSV阳性检出率为7.5%.
猪圆环病毒-Ⅱ型、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、荧光定量PCR、检测方法
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S852.65(动物医学(兽医学))
吉林省科技发展计划资助项目20200602048ZP
2022-09-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
1309-1314