基于血清4型禽腺病毒fiber-1蛋白间接ELISA检测方法的建立

摘要：

为了获得血清4型禽腺病毒(fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)fiber-1重组表达蛋白,并建立快速鉴别检测方法,本试验将FAdV-4 fiber-1基因连入pET-32a表达载体,转化BL21(DE3)感受态细胞,将测序正确的重组蛋白经IPTG诱导表达、纯化和Western blot鉴定.以纯化的pET-32a-fiber-1重组蛋白作为ELISA包被抗原,优化反应条件,建立了检测FAdV-4抗体的fiber-1-ELISA方法.结果成功表达pET-32a-fiber-1蛋白,证实可与FAdV-4阳性血清特异性结合,具有良好的反应原性.特异性结果显示,除FAdV-4与FAdV-10外,与其他病原的抗体无交叉反应;阳性血清稀释1 600倍仍可检测到,批内和批间最大变异系数均小于10％.检测了 176份临床样品,75份为阳性,101份为阴性.fiber-1-ELISA方法易于操作,特异性强,重复性好,为FAdV-4抗体监测提供了有效方法.

关键词：血清4型禽腺病毒、fiber-1蛋白、原核表达、间接ELISA

所属期刊栏目：42

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：广西科技基金资助项目;广西兽医生物技术重点实验室自主研究资助项目;广西八桂学者专项基金资助项目;国家“万人计划”领军人才项目;广西科技基地和人才专项基金资助项目

在线出版日期：2022-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1131-1136,1183