10.16303/j.cnki.1005-4545.2022.03.16
羊口疮病毒LAMP-LFD快速检测方法的建立与初步应用
根据羊口疮病毒(OrfV)的B2L基因设计4条环介导等温扩增(LAMP)特异性引物和1条异硫氰酸荧光素标记的DNA探针,再利用横向流动试纸条(LFD)检测扩增产物.通过对各反应条件包括反应温度、反应时间、内外引物浓度比、Bst DNA 2.0聚合酶浓度、dNTP Mix浓度、Mg2+浓度以及探针结合温度等优化后,建立了检测OrfV的LAMP-LFD方法.结果显示,LAMP-LFD可特异性检测OrfV,而山羊痘病毒、口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒及丝状支原体山羊亚种等均未检出;LAMP-LFD对OrfV-B2L质粒DNA最低检测浓度为4.95×-2拷贝/μL,其灵敏度是以外引物建立PCR方法的1 000倍.利用PCR和LAMP-LFD检测29份临床样品,两者检出符合率为100%.研究建立的LAMP-LFD检测方法可快速、特异地检测OrfV,可作为早期诊断和检测OrfV的有效手段.
羊口疮病毒、B2L基因、环介导等温扩增技术、横向流动试纸条
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S852.65(动物医学(兽医学))
贵州省大学生创新创业训练资助项目;贵州省科技计划资助项目;贵州省科学技术基金资助项目
2022-07-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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