10.16303/j.cnki.1005-4545.2021.09.09
牛结节性皮肤病病毒GPCR基因荧光定量PCR检测方法的建立
为了更好地进行牛结节性皮肤病的临床检测,根据GenBank登录的牛结节性皮肤病病毒(LSDV)的GPCR基因序列,设计并合成1对特异性引物,建立一种基于染料法的实时荧光定量PCR(qPCR)方法.本研究进一步对此检测方法进行了敏感性试验、特异性试验、重复性试验,随后用模拟临床样品进行了验证.结果 显示,该方法至少可以检测出的病毒序列含量为7.11×102拷贝/μL;仅对LSDV有特异性扩增;批内重复和批间重复的Cq值变异系数均小于1.5%.模拟临床样品检测结果显示,建立的qPCR方法在临床采集的牛皮肤结节、肛拭子、泪拭子中,能特异性检测出LSDV的序列片段.结果 表明,本研究建立的LSDV的qPCR检测方法敏感性高、特异性强、重复性好,能应用于临床诊断.
牛结节性皮肤病病毒;染料法;GPCR基因;实时荧光定量PCR
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S852.65(动物医学(兽医学))
广东省重点领域研发计划资助项目;广东省教育厅高校科研资助项目;佛山市科技创新资助项目
2021-10-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
1729-1733