IL-17A对山羊乳腺上皮细胞分泌免疫防御因子功能的影响

摘要：

白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)是Th17细胞的特征性细胞因子,被认为是一种关键的炎性细胞因子,在宿主抵抗胞外菌、真菌感染,以及炎症、超敏反应、自身免疫性疾病等多种疾病的病程中起到了重要的作用.为研究IL-17A对山羊乳腺上皮细胞免疫防御功能的影响,本研究根据GenBank公布的奶山羊IL-17A完全CDS区序列设计了真核表达引物,从Con A活化的奶山羊外周血单个核细胞(PBMCs)中提取总RNA,反转录PCR法扩增目的序列.扩增出的目的片段连接于真核表达载体pEGFP-Nl,并转入大肠杆菌Trans5α感受态细胞保存,将鉴定正确的重组质粒命名为IL-17A-pEGFP-Nl.将重组质粒转染入HEK293T细胞进行瞬时表达,收取真核表达上清作为刺激物.选取成年健康奶山羊,通过组织块贴壁法制备原代山羊乳腺上皮细胞(GMEC).用IL-17A真核表达上清(终质量浓度:15 mg/L)刺激山羊乳腺上皮细胞,通过Real-time PCR方法检测GMEC分泌的各种促炎性细胞因子、趋化因子以及防御性蛋白表达水平的变化.结果表明,IL-17A可以促进山羊乳腺上皮原代细胞分泌多种促炎性细胞因子、趋化因子和防御性蛋白,暗示IL-17A可能参与了奶山羊乳腺炎的发生,并在山羊乳腺免疫防御中起到了一定的调节作用.

关键词：山羊、白细胞介素-17A、真核表达、乳腺防御

所属期刊栏目：40

分类号：S852.42(动物医学（兽医学）)

资助基金：陕西省科技统筹创新工程计划资助项目;青海省重点研发与转化计划资助项目;咸阳市重大科技专项计划资助项目

在线出版日期：2021-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：2205-2213