毒害艾美耳球虫纳米PCR检测方法的建立及初步应用

摘要：

毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)是引起鸡急性小肠球虫病最重要的病原,为了对毒害艾美耳球虫进行快速特异性检测,本研究基于毒害艾美耳球虫ITS-2基因序列,通过退火温度、引物用量等反应条件的优化,建立了鸡毒害艾美耳球虫特异性纳米PCR检测方法.结果显示,该方法成功扩增出毒害艾美耳球虫约380 bp的特异性片段,其最低检出质量浓度为3.64 μg/L,敏感性是普通PCR的100倍;进一步对毒害艾美耳球虫、柔嫩艾美耳球虫、贝氏隐孢子虫等多种病原的DNA样品进行扩增,该方法仅能扩增出毒害艾美耳球虫的目的片段.利用所建立的纳米PCR检测方法对40份鸡的粪便样品进行检测,发现受检样品中毒害艾美耳球虫阳性率为35.0％(14/40),与普通PCR检测结果一致.结果表明,本研究建立的毒害艾美耳球虫纳米PCR检测方法能够实现对毒害艾美耳球虫的快速准确检测,且与普通PCR相比具有更高的敏感性和特异性,为毒害艾美耳球虫感染的临床鉴别诊断和防控提供了技术基础.

关键词：鸡、毒害艾美耳球虫、纳米PCR、ITS-2、临床检测

所属期刊栏目：40

分类号：S852.729(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家"十三五"重点研发计划资助项目2017YFD0501200

在线出版日期：2021-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2139-2144