生殖激素对山羊颗粒细胞孕酮合成的影响

摘要：

试验以山羊颗粒细胞为研究对象,采集卵泡(ψ2～5 mm)颗粒细胞进行无血清培养2d后,用FSH、LH(2.5IU/mL或1.25 IU/mL)和E2(1 mg/L)单独或联合处理0～96 h,分别收集细胞和培养液,用放射免疫分析法(RIA)检测培养液中孕酮(P4)水平,用实时荧光定量PCR (qPCR)和蛋白免疫印迹(WB)技术检测颗粒细胞孕酮相关基因和蛋白的表达.结果 显示,激素联合或单独处理24 h后,FSH/LH/E2 (2.5/2.5/1)组的孕酮水平与LH(2.5)组相当,均显著高于其他4组(P＜0.01),然而,在处理48,72,96h时间点,各组间均无显著性差异(P＞0.05).FSH/LH/E2(2.5/2.5/1)组处理后72,96 h的孕酮水平极显著低于0,24 h(P＜0.01);FSH/LH/E2 (1.25/1.25/1)组与FSH(2.5)组的孕酮水平24 h显著下降(P＜0.05),但48 h又显著高于24 h(P＜0.05);LH(2.5)组的孕酮水平96 h显著下降(P＜0.05);E2(1)组和对照组的孕酮水平均在24 h显著下降(P＜0.05).qPCR结果显示,FSH/LH/E2 (2.5/2.5/1)处理不同时间后PTGFR、HSD3B和StAR基因在24 h表达量极显著升高(P＜0.01),随后表达量均逐渐下降,且处理后96 h的基因表达量均极显著低于0h组(P＜0.01).WB结果显示,激素处理24 h后HSD3B在FSH/LH/E2(2.5/2.5/1)组的蛋白表达量极显著高于其他组(P＜0.01);P450scc在FSH/LH/E2 (2.5/2.5/1)组的蛋白表达量与对照组相比有升高趋势(P =0.060 4),其他各组间无趋势变化(P＞0.1);而CYP19A1表达量在6个组中无显著性差异(P＞0.05).结果 表明,FSH、LH和E2联合处理更有利于体外无血清培养的山羊颗粒细胞合成孕酮,为进一步研究生殖激素在山羊卵巢卵泡-黄体转化中的作用奠定理论基础.

关键词：生殖激素、山羊、颗粒细胞、无血清培养、P4

所属期刊栏目：40

分类号：S813;S852.2(普通畜牧学)

资助基金：国家重点研发计划资助项目;江苏省重点研发计划现代农业资助项目

在线出版日期：2020-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1652-1659