猪传染性胃肠炎病毒可视化RT-LAMP检测方法的建立

摘要：

通过对比猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)主要流行毒株的M基因序列,选择其高度保守的区域设计LAMP引物,以羟基萘酚蓝(HNB)为指示剂,建立了1种快速检测TGEV的可视化环介导等温扩增方法.结果 显示,采用建立的方法在恒温水浴锅中约1h即可完成检测;用该方法检测猪流行性腹泻病毒,猪轮状病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒,猪细小病毒,猪圆环病毒,均不发生交叉反应;以pET-21b-M质粒为模板评价所建立方法的敏感性,最低检测限为3.7×103个拷贝,比普通PCR方法高2个数量级;在反应前向反应体系中加入HNB,反应结束后阳性反应管颜色从紫罗兰色变为天蓝色,阴性反应管颜色无变化,且阴阳性管颜色差异明显.用建立的方法对收集的42份临床腹泻样品进行检测,共检测到21份样品阳性.为快速检测TGEV提供方法.

关键词：猪传染性胃肠炎病毒、环介导等温扩增、可视化、检测方法

所属期刊栏目：40

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划项基金资助目;陕西省农业科技创新转化基金资助项目

在线出版日期：2020-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1272-1279,1285