奶牛脂肪间充质干细胞体外分离培养与鉴定

摘要：

探讨奶牛脂肪来源的间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,AD-MSCs)体外分离培养方法及其生物学特性.采集不同部位奶牛脂肪,选用o.25％胰蛋白酶消化,并进行贴壁培养,获取原代奶牛AD-MSCs,通过传代培养进一步纯化扩增.显微镜观察细胞形态及生长特征,并采用MTT法绘制2种AD-MSCs生长曲线,利用免疫荧光化学染色法检测其表面标志物,对该细胞进行了向成骨及成脂诱导分化培养试验,采用油红O和钙盐染色法对其分化能力进行鉴定.比较研究了不同部位脂肪的形态,2种不同部位的AD-MSCs均呈长梭形、纺锤形或多角形贴壁生长,且2个部位来源的AD-MSCs的生长曲线无明显差异(P＞0.05).分离培养的AD-MSCs的表面标志物CD44和CD73呈阳性表达,而CD34和CD45呈阴性表达.在诱导分化培养试验中呈现出较强的成脂和成骨分化能力.本试验选取不同部位的脂肪组织,成功的分离并鉴定了奶牛AD-MSCs,为纯化鉴定奶牛AD-MSCs提供了依据.

关键词：奶牛、间充质干细胞、体外分离培养、体外诱导分化

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分类号：Q813.1(生物工程学(生物技术))

资助基金：研究生创新科研资助项目;黑龙江省农垦总局重点科研资助项目;黑龙江八一农垦大学“三纵三横”科研人才支持计划一基础培育计划资助项目

在线出版日期：2020-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1042-1046,1058