褪黑素对水貂GV期卵母细胞冷冻保存效率的影响

摘要：

旨在探究水貂生发泡期(GV期)卵丘-卵母细胞复合体(COCs)玻璃化冷冻、解冻及培养过程中添加褪黑素(melatonin,MT)对水貂卵母细胞解冻后存活率、体外培养COCs恢复减数分裂比例(GVBD率)、体外培养卵母细胞活性线粒体的分布以及体外培养COCs颗粒细胞糖酵解相关基因表达(卵母细胞与颗粒细胞缝隙连接好坏的标志分子)的影响.试验分为3组:无冷冻处理的对照组(C组)、冷冻组(Ⅴ组)和添加MT(10-9 mol/L)的冷冻处理组(MT组).结果 显示:MT组卵母细胞在解冻后3h的存活率(91％±4.8％,n=91)与Ⅴ组的存活率(90％±2.7％,n=75)差异不显著(P＞0.05),但两组存活率显著低于C组(100％,n=80) (P＜0.05);C组(81％±1.9％,n=64)和MT组卵母细胞的GVBD率(70％±2.7％,n=80)显著高于Ⅴ组(55％±4.1％,n=80) (P＜0.05),但C组与MT组相比差异不显著(P＞0.05);免疫荧光结果显示,MT组的卵母细胞线粒体正常分布率(34％±3.8％,n=75)与Ⅴ组(30％±2.3％,n=60)相比差异不显著(P＞0.05),但MT和Ⅴ组的卵母细胞线粒体正常分布率显著低于C组(79％±3.4％,n=90)(P＜0.05);qRT-PCR结果显示,MT组颗粒细胞糖酵解基因Ldh1、Pkm2及Pfkp的表达量显著高于Ⅴ组(P＜0.05),但前两者糖酵解基因的表达量显著低于C组(P＜0.05).结果 表明,添加MT可以提高冻融后水貂卵母细胞的GVBD率,降低冷冻对卵母细胞和颗粒细胞连接的冷冻损失,但要建立一个高效的水貂GV期卵母细胞玻璃化冷冻保存体系仍需进一步研究.

关键词：褪黑素、水貂、卵母细胞、玻璃化冷冻

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分类号：S865.2;S814.6(狩猎、野生动物驯养)

资助基金：吉林省国际科技合作资助项目;中国农业科学院科技创新工程资助项目;中国农业科学院科技创新工程协同创新资助项目

在线出版日期：2020-05-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：816-822