K亚群禽白血病病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

摘要：

根据K亚群禽白血病病毒(ALV-K) gp85基因序列设计1对引物,对反应条件和反应体系进行优化,建立了快速检测ALV-K的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法.该方法在1～107 copies/μL范围内具有良好的线性关系,灵敏度达到1 copies/μL,是常规PCR方法的100倍.该方法与经典亚群ALV及其他常见禽免疫抑制病病毒无交叉反应,批间与批内重复性试验变异系数均小于2％.将ALV-K原型株JS11C1通过卵黄囊接种途径感染SPF鸡,运用本试验建立的实时荧光定量PCR方法,对感染鸡体内各器官的病毒分布及病毒载量进行了检测.结果 显示,在感染鸡的心脏、脾脏、肺脏、肾脏等器官中均可检测到病毒,其载量无明显差异.结果 表明,本试验所建立的实时荧光定量PCR方法具有敏感度高、特异性强和重复性好的优点,可用于ALV-K的快速、定量检测,该方法同时为ALV-K致病机制的研究提供了良好的技术手段.

关键词：K亚群禽白血病病毒(ALV-K)、实时荧光定量PCR、病毒载量

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分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家“十三五”重点研发计划资助项目;山东省自然科学基金博士基金资助项目;山东省“双一流”奖补资金项目

在线出版日期：2020-05-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：524-529