表达MERS-CoVS1蛋白重组狂犬病病毒rSRV9-MERSS1纯化方法的建立

摘要：

建立一种可线性放大、应用于表达中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV) S1蛋白重组狂犬病病毒rSRV9-MERSS1的规模化纯化方法.将收获的病毒去除细胞碎片、灭活后,分别通过3种方法(醋酸锌沉淀+Sepharose 4FF凝胶过滤层析、500 000中空纤维超滤柱+Sepharose 4FF凝胶过滤层析、500 000中空纤维超滤柱+ CellufineTM Sulfate亲和层析)进行纯化,经比较筛选出一种温和、目的蛋白回收率高、纯度高的纯化方法.结果 显示,500 000中空纤维超滤柱+ Sepharose 4FF凝胶过滤层析回收的抗原含量最高,50 mL重组病毒原液经纯化后可得到1.82 mg蛋白,杂蛋白去除率达到97.02％,病毒纯度较高,电镜下可见到病毒囊膜刺突.结合成本等方面综合考虑,此方法优于其他2种纯化方法.本试验筛选获得了一种适用于rSRV9-MERSS1的纯化方法,为rSRV9-MERSS1规模化纯化工艺的建立与MERS新型疫苗的研制奠定了基础.

关键词：MERS-S1、纯化、中空纤维超滤柱、Sepharose 4FF、亲和层析

所属期刊栏目：39

分类号：S852.65;S855.9(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家“十三五”重点研发计划资助项目2016YFD0501004

在线出版日期：2019-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1763-1769