生长抑素基因疫苗pVAX1-TRX-SS的构建及对猪生长的影响

摘要：

用带有生长抑素CDS(sequence coding for amino acids in protein)区的引物,以pET32a(+)中的TRX标记基因为模板,扩增获得生长抑素(somatostatin,SS)-硫氧还原蛋白(thioredoxin,TRX)基因,并将该段基因插入pVAX1质粒载体中,构建pVAX1-TRX-SS真核表达质粒,酶切和测序鉴定表明质粒构建正确.用Lipofectamine(R) 2000 Reagent将上述质粒转染CHO细胞进行瞬时表达,24 h后提取细胞总蛋白,Western blot能检测到目的蛋白.选取60日龄去势公猪18头,随机分为3组,分别于半膜肌注射0 mg(生理盐水),1 mg和2 mg pVAX1-TRX-SS质粒,生理盐水对照组为Ⅰ组,1 mg和2 mg组分别为Ⅱ和Ⅲ组,注射后用活体基因导入仪电击处理.结果显示,免疫后5周,Ⅱ组和Ⅲ组平均日增重分别比Ⅰ组提高13.92％ (P＜0.05)和11.40％(P＞0.05),料重比分别降低了6.19％和3.33％ (P＞0.05).免疫后2周,Ⅱ组血清中生长抑素含量显著低于Ⅰ组;Ⅲ组血清中生长抑素含量则在免疫后4周显著低于Ⅰ组.Ⅱ组生长抑素抗体阳性率于免疫后4周达到峰值80％,Ⅲ组则在免疫后4周达到80％并维持到免疫后6周.上述结果表明,pVAX1-TRX-SS真核表达质粒能在真核细胞中表达,免疫猪后使猪产生了生长抑素抗体,有效中和了内源性生长抑素,对猪的生长有一定促进作用.

关键词：生长抑素、电击处理、去势公猪、生长性能

所属期刊栏目：38

分类号：S816.73;S852.52;Q78(普通畜牧学)

资助基金：国家重点研发计划资助项目2016YFD0500503;国家自然科学基金面上资助项目31472163;广东省饲料产业创新体系基金资助项目2017LM1121

在线出版日期：2019-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2360-2365