犬瘟热病毒N基因重组狂犬病病毒的拯救与鉴定

摘要：

探究犬瘟热病毒N基因重组狂犬病病毒的拯救及鉴定,为后期犬瘟热-狂犬病二联口服弱毒活疫苗的研制奠定基础.采用脂质体转染的方法,将纯化后的重组质粒(pcDNA-N-G-EGFP-CDVN-PM-L)与辅助性表达质粒(pcDNA-N、pcDNA-G、pcDNA-P、pcDNA-L)共转染BSR细胞,通过RT-PCR和间接免疫荧光技术进行检测并鉴定.结果显示,对盲传至第6代、第9代病毒液进行RT-PCR检测,均出现与预期相符的目的片段(狂犬病病毒N基因片段大小为1 315 bp,犬瘟热病毒CDV-N基因片段大小为1 653 bp).间接免疫荧光试验后在激光共聚焦显微镜下,试验组均可观察到大量绿色荧光表达.RT-PCR结果与间接免疫荧光试验结果相吻合,表明犬瘟热病毒N基因重组狂犬病病毒拯救成功.

关键词：重组狂犬病病毒、犬瘟热病毒N基因、反向遗传学、RT-PCR、间接免疫荧光

所属期刊栏目：38

分类号：S852.65;R535(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金-地区基金资助项目31360623

在线出版日期：2019-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2334-2338