3种致毛皮动物肺炎病原菌多重PCR检测方法的建立

摘要：

大肠杆菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌是引起毛皮动物肺炎的最为常见的细菌性病原.本研究选择3种细菌的特异性基因,分别为phoA(大肠杆菌)、plcH(铜绿假单胞菌)和khe(克雷伯菌)基因,进行多重PCR方法的建立,预期扩增目的条带大小分别为720,199,428 bp.通过反应条件的优化,选择退火温度54.5℃,引物体积(按照phoA、plcH和khe顺序,浓度10 μmol/L)为0.50,0.75,2.00 μL.敏感性试验结果显示,大肠杆菌和肺炎克雷伯菌最低检测DNA质量浓度为1 mg/L(1 μL),而铜绿假单胞菌的最低检测质量浓度为100 μg/L(1 μL).利用建立的多重PCR方法对临床样品进行检测,结果表明该方法能够有效检测出3种病原菌.

关键词：毛皮动物、肺炎、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、多重PCR

所属期刊栏目：38

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：河北省农业关键共性技术攻关专项资助项目16227525;河北省高等学校科学技术研究资助项目ZD2017234,ZD2016067;秦皇岛市科技创新平台建设运行经费资助项目201702B001;石家庄市科学技术研究与发展计划资助项目171500953A;秦皇岛市科学技术研究与发展计划资助项目201602A46;河北省第三批巨人计划-中草药防治畜禽水产养殖动物传染病科研创新团队资助项目

在线出版日期：2019-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2322-2326