猪流行性腹泻病毒和猪博卡病毒3/4/5型二重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR方法的建立

摘要：

根据GenBank中登录的猪流行性腹泻病毒(PEDV)M基因序列和猪博卡病毒(PBoV)不同基因型VP1基因序列,设计2对特异性引物,分别扩增PEDV M基因与PBoV3/4/5型VP1基因,回收扩增产物分别克隆入pMD(R) 18-T载体,构建重组质粒,作为荧光定量PCR的模板,经过反应条件优化,建立了检测PEDV与PBoV3/4/5型的二重SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法.结果表明,该检测方法线性关系良好,能特异、敏感性检测PEDV与PBoV3/4/5型;对PEDV与PBoV3/4/5型的最低检测极限分别为72.6 copies/μL和76.9 copies/μL,为常规PCR方法的100～1 000倍;本研究建立的PEDV和PBoV3/4/5型荧光定量PCR方法具有良好的特异性、敏感性、重复性,为快速、高效检测PEDV和PBoV提供了技术帮助.

关键词：猪流行性腹泻病毒、猪博卡病毒、荧光定量PCR

所属期刊栏目：38

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：河南省产学研合作计划资助项目152107000003

在线出版日期：2019-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2252-2257