传染性法氏囊病病毒VP2结构蛋白抗体ELISA检测方法的建立

摘要：

为建立敏感、特异、稳定的传染性法氏囊病病毒(IBDV) VP2结构蛋白抗体ELISA检测方法,本试验以杆状病毒表达系统表达的重组IBDV-VP2结构蛋白为抗原,通过包被VP2单克隆抗体捕捉VP2结构蛋白的形式,建立鸡血清VP2结构蛋白抗体ELISA检测方法(VP2-ELISA).条件优化结果显示:单克隆抗体最适包被质量浓度为3 mg/L,VP2最佳稀释度为1∶20,夹心ELISA效价1∶12.8,被捡血清的稀释度为1∶400.该方法与禽流感、鸡新城疫、鸡马立克氏病、鸡传染性喉气管炎病毒及杆状病毒阳性血清无交叉反应,对琼扩效价为1∶32的IBDV阳性血清的最低检出量为1∶12 800,ROC曲线确定的D450nm临界值为0.236,组内、组间重复性试验变异系数均小于10％.用本试验建立的VP2-ELISA方法与进口IBDV-ELISA抗体试剂盒平行检测100份背景已知的临床鸡血清样品,总符合率VP2-ELISA(97％)高于进口ELISA试剂盒(96％).本试验为进一步研制鸡传染性法氏囊病病毒VP2结构蛋白抗体ELISA检测试剂盒奠定基础.

关键词：传染性法氏囊病病毒、VP2、单克隆抗体、ELISA

所属期刊栏目：38

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划资助项目2016YFD0500800;国家自然科学基金资助项目31572504;江苏省自然科学基金资助项目BK20151366;江苏省农业科技自主创新资金资助项目EX[16]1052

在线出版日期：2018-12-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1864-1871