PPRV受体信号转导淋巴细胞激活分子V区功能蛋白的表达及活性分析

摘要：

信号转导淋巴细胞激活分子(SLAM)是小反刍兽疫病毒(PPRV)感染宿主的主要细胞受体,其N端V结构域的表达活化可以启动PPRV的入侵感染.本试验选用Slam /V结构域作为功能靶标进行表达,并分析其活性.分离山羊外周血淋巴细胞,提取其基因组RNA,应用RTPCR方法扩增山羊SLAM/V基因,构建原核表达载体pGEX-6P-1/Slam/V.将获得的重组质粒pGEX-6P-1/Slam/V转化BL21(DE3)感受态细胞,通过SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行分析和验证.结果显示,IPTG诱导浓度为0.1 mmol/L、37℃,诱导14 h时,靶标蛋白表达量最高,融合蛋白相对分子质量约为39 800,且主要以包涵体形式存在.经山羊抗人SLAM蛋白多克隆抗体识别鉴定,证实其具有良好的免疫反应活性.本试验为建立稳定表达山羊SLAM/V功能区的阳性细胞克隆及PPRV侵染路径研究奠定了基础.

关键词：小反刍兽疫病毒、信号转导淋巴细胞激活分子、表达、活性分析

所属期刊栏目：38

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家现代肉羊产业技术体系资助项目nytytx-39;内蒙科技专项“巴美肉羊产业化技术研究与集成应用”;兰州市科技局创新人才重点资助项目2015-RC-7

在线出版日期：2018-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1295-1299