表达A型产气荚膜梭菌FBA蛋白的延迟裂解型沙门菌载体的构建

摘要：

利用PCR技术扩增FBA基因序列,并将其克隆到表达载体pET-30a(+)中,获得pET-30a-FBA重组质粒.将重组质粒转化到BL21感受态细胞中,经IPTG诱导表达His-FBA蛋白,通过His-tag Ni柱亲和层析纯化后,免疫新西兰大白兔制备FBA特异性多克隆抗体.再利用PCR技术将FBA基因与表达载体pYA3681连接,构建了表达载体pYA5129,电转至延迟裂解性沙门菌x11802后以制备的FBA多抗为一抗进行免疫印迹试验,验证了其免疫原性;同时比较了不同浓度阿拉伯糖对重组沙门菌生长性能的影响,优化了阿拉伯糖最佳添加浓度,为后续研究其作为肉鸡坏死性肠炎疫苗的可行性奠定基础.

关键词：A型产气荚膜梭菌、FBA、原核表达、多克隆抗体、延迟裂解型沙门菌

所属期刊栏目：38

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家“863”计划资助项目2013AA102806;国家自然科学基金资助项目31272552,31272541,31672528,31602092;吉林省科技发展计划项目20160519011JH;吉林省工业创新特殊项目2016C063

在线出版日期：2018-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：906-910