基孔肯雅病毒E1基因重组腺病毒的构建、鉴定及稳定性

摘要：

构建表达基孔肯雅病毒E1蛋白的重组腺病毒,鉴定该重组腺病毒,并对该重组腺病毒的稳定性进行研究.本研究通过构建重组腺病毒穿梭质粒Ad5-EGFP-CHIKV-E1,将质粒Ad5-EGFP-CHIKV-E1与腺病毒骨架质粒共转染HEK293细胞获得重组腺病毒rAd5-EGFP-CHIKV-E1,并通过Western blot与PCR方法鉴定E1基因表达的稳定性.PCR鉴定结果表明重组腺病毒可扩增1 323 bp大小的条带;经Western blot鉴定重组腺病毒可表达大小为52 000的E1蛋白.结果表明,重组腺病毒rAd5-EGFP-CHIKV-E1可以成功表达基孔肯雅病毒E1基因;提取第0,2,4,6,8,10,12,14,16代重组腺病毒基因组,经PCR鉴定证实重组腺病毒在16代内稳定性良好.成功构建出表达基孔肯雅病毒E1基因的重组腺病毒rAd5-EGFP-CHIKV-E1,该病毒可以稳定表达,为研发基孔肯雅病毒疫苗奠定基础.

关键词：基孔肯雅病毒E1基因、重组腺病毒、构建、鉴定、稳定性

所属期刊栏目：38

分类号：S852.65;R535(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划资助项目2016YFC1200901

在线出版日期：2018-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：709-715