10.16303/j.cnki.1005-4545.2018.02.30
SIGIRR对奶牛乳腺上皮细胞TLR4致炎信号通路的负调控作用
旨在探究SIGIRR对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs) TLR4信号通路的负调控作用.构建SIGIRR-pEGFP真核表达载体,脂质体法转染HEK293T及BMECs,荧光显微镜观察及Western blot验证融合蛋白SIGIRR-pEGFP的表达;LPS刺激转染后BMECs,检测TLR4及其信号通路分子IRAK1、IRAK4和TRAF6的变化,以及下游炎性因子IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-α的表达量.结果显示,成功构建SIGIRR-pEGFP真核表达载体,荧光检测重组质粒转染到HEK293T和BMECs中;Western blot鉴定融合蛋白SIGIRR-pEGFP表达正确;重组质粒转染BMECs后,SIGIRR表达量较转染空载质粒组及空白未转染组显著升高(P<0.01);炎性因子II-6、IL-8、IL-1β、TNF-α、TLR4及下游信号分子IRAK1、IRAK4、TRAF6表达量显著降低(P<0.01),转染空载质粒组与空白未转染组相比仅IRAK1表达量有差异(P<0.05).结果表明,本试验通过研究牛SIGIRR在BMECs中的作用,证实SIGIRR基因具有炎性负调控LPS-TLR4信号通路的作用,具有潜力成为临床治疗奶牛乳腺炎的新靶标.
奶牛、乳腺炎、乳腺上皮细胞、SIGIRR、TLR4信号通路、负性调控
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S852.2;S857.26(动物医学(兽医学))
国家肉牛/牦牛产业技术体系资助项目nycytx-38;宁夏肉牛呼吸疾病综合征及皮肤病防控技术研究与示范资助项目2012ZDN0903;中央高校基本科研业务费专项资金资助项目2662015PY054;湖北省自然科学基金资助项目2015CFB435
2018-05-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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