猪弓形虫感染免疫胶体金试纸条的制备与初步应用

摘要：

制备1种检测猪弓形虫血清循环抗原的免疫胶体金试纸条.利用柠檬酸三钠还原法制备40 nm的胶体金溶液,标记抗弓形虫表面抗原SAG3(surface antigen 3,SAG3)单克隆抗体(Anti-A-SAG3-7),用另1株抗弓形虫表面抗原SAG3单克隆抗体(Anti A-SAG3-23)与羊抗小鼠IgG抗体分别包被于硝酸纤维素膜(NC膜)上的检测线和质控线,制备并优化免疫胶体金试纸条检测条件.胶体金溶液的最适pH值为加入4μL 0.2 mol/L K2CO3时的pH值.Anti-A-SAG3-7的最适标记量为12 μg.最佳NC膜为Millipore 135.T、C线抗体最佳包被质量浓度均为0.25 g/L,T、C线抗体最佳包被体积均为8μL.试纸条的灵敏度达1∶160,与猪囊虫阳性血清无交叉反应.稳定性试验表明,该试纸条置于室温至少可保存1个月有效,置于4℃可保存3个月有效.对广东某地区、吉林某地区猪场的各94份猪待检血清进行检测,分别有17,10份为阳性血清,样品阳性率为18.08％,10.63％.本研究制备的胶体金试纸条具有操作简单,敏感特异等优点,适合临床基层单位对猪弓形虫病的早期诊断及流行病学调查.

关键词：刚地弓形虫、SAG3、循环抗原、胶体金

所属期刊栏目：38

分类号：S852.7(动物医学（兽医学）)

资助基金：吉林省科技发展计划资助项目20130206023NY;国家公益性行业农业科研专项资助项目201303042

在线出版日期：2018-02-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：82-87