猪CD151基因的克隆及过表达细胞系的构建

摘要：

猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)主要感染猪肺泡巨噬细胞,但对猪源的其他细胞系不易感.本试验通过构建PK15-CD151和3D4/21-CD151过表达细胞系,为深入研究PRRSV感染宿主细胞的机制奠定基础.应用分子生物学方法、实时荧光定量PCR和荧光显微镜技术,对基因CD151在组织中的分布情况进行检测、基因克隆、真核表达栽体的构建、对CD151在PK15和3D4/21细胞内的过表达情况,以及对细胞生长增殖的影响进行了研究.结果显示:CD151基因在不同组织内均有表达,但表达量有差异;PB真核表达载体构建成功,荧光显微镜下可见转染PB载体和CD151基因共转染的PK15和3D4/21细胞表达强烈的绿色荧光,实时荧光定量PCR分析结果进一步证实,CD151在转染后的细胞中获得超表达,并且对细胞的生长增殖无影响.本试验成功构建了PK15-CD151和3D4/21-CD151过表达细胞系,过表达细胞系的成功构建为进一步探索CD151在PRRSV感染细胞过程中的协同作用提供了细胞模型,特别是对深入研究PRRSV的入侵及宿主识别具有重要意义.

关键词：PRRSV、猪CD151、基因克隆、载体构建、PK15和3D4/21细胞、真核表达

所属期刊栏目：38

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：河北省现代农业产业技术体系奶牛产业创新团队建设项目奶牛疾病防控技术研发与示范资助项目HBCT2013080204;河北省科技计划资助项目13826614D

在线出版日期：2018-02-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：33-38,50