牛支原体TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

本研究旨在建立一种快速检测牛支原体(Mycoplasma bovis)的实时荧光定量PCR检测方法.根据GenBank 中收录的牛支原体OPPD/F基因序列(登录号:AF130119),利用Primer 5.0软件设计特异性引物与TaqMan探针,以重组质粒作为绝对定量模板,构建检测牛支原体的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法.结果显示该检测方法线性关系良好,标准曲线的相关系数R2=0.994,扩增效率E=1.280.荧光定量PCR法检测的敏感性是常规PCR的10倍;特异性良好,检测9种相关细菌和病毒均为阴性;重复性好,组内及组间样本检测Ct值均小于2％.牛支原体TaqMan实时荧光定量PCR检测方法较之于常规PCR方法有快速、特异性强、敏感性高、稳定性好的优点.

关键词：牛支原体、OPPD/F基因、荧光定量PCR

所属期刊栏目：37

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技支撑计划资助项目2015BAI07B02-06

在线出版日期：2017-07-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1059-1064