CD163片段在PRRSV感染过程中的作用

摘要：

使用Scanprosite软件对猪肺泡巨噬细胞的CD163蛋白结构和功能域进行预测,并对其进行分段克隆,构建原核表达载体pET-28a(Y-P1,Y-P2,Y-P3),片段位置Y-P1(160～798 bp),Y-P2(790～20 146 bp),Y-P3(2 143～3 084 bp).利用镍柱纯化重组蛋白,免疫小鼠获得特异性抗体.通过病毒阻断试验,验证Y-P1,Y-P2,Y-P3的PRRSV阻断情况;构建真核表达载体pCD163,P1(1～798 bp),P2(790～2 046 bp),P3(2 023～3 345 bp)分别转染PRRSV非易感细胞系BHK-21,验证其PRRSV感染情况.结果显示,经PCR、双酶切及测序鉴定构建的原核和真核表达载体是正确的,SDS-PAGE检验Y-P1,Y-P2,Y-P3蛋白大小分别为27 000,46 000,39 000.Y-P2蛋白,抗Y-P2的小鼠血清能够阻断PRRSV感染Marc-145细胞;转染pCD163的细胞系能够感染PRRSV,而P1,P2,P3片段不感染PRRSV.CD163其790～2 046 bp可能是PRRSV感染细胞与CD163受体作用位点.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒、CD163、病毒阻断

所属期刊栏目：36

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：上海市科技人才计划资助项目14YF1414600

在线出版日期：2016-11-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1665-1671